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A:純化過程中提高緩沖液鹽離子濃度(<2M)助溶;添加DTT(<100mM)打開二硫鍵,防止蛋白形成聚體導(dǎo)致沉淀;添加甘油或蔗糖(5%-10%)等保護(hù)劑。
A:液體或者凍干發(fā)貨。
A:sumo酶切、TEV酶切、3C酶切(優(yōu)先SUMO酶切)。
A:可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行嘗試:
更換不同的信號(hào)肽進(jìn)行嘗試; 在目的序列N端添加大標(biāo)簽,如MBP/Fc等,MBP在真核系統(tǒng)中可能不掛柱,還需要融合其他標(biāo)簽用于純化,F(xiàn)c標(biāo)簽可以用于純化。
更換不同的信號(hào)肽進(jìn)行嘗試;
在目的序列N端添加大標(biāo)簽,如MBP/Fc等,MBP在真核系統(tǒng)中可能不掛柱,還需要融合其他標(biāo)簽用于純化,F(xiàn)c標(biāo)簽可以用于純化。
A:質(zhì)粒質(zhì)量:內(nèi)毒素水平、有無蛋白或核酸污染、超螺旋比例等。
蛋白自身因素:細(xì)胞因子、衣殼蛋白、激素類、膜蛋白等、或分子量過大或過小的蛋白。
細(xì)胞狀態(tài),觀察是否有污染,細(xì)胞密度等。
工具包適配BY4741、CEN.PK等常用實(shí)驗(yàn)室菌株,工業(yè)菌株需定制。
僅需標(biāo)準(zhǔn)分子生物學(xué)設(shè)備(PCR儀、電泳系統(tǒng)、離心機(jī)等),無特殊儀器要求。
標(biāo)準(zhǔn)交付周期為2-4個(gè)工作日(視區(qū)域而定),提供在線技術(shù)支持。用戶還可提交定制化元件需求(如特定啟動(dòng)子/報(bào)告基因)。
支持。工具包預(yù)留CRISPR接口,用戶可結(jié)合Cas9系統(tǒng)進(jìn)行更復(fù)雜的基因組編輯(如大片段刪除、點(diǎn)突變引入)。
庫容大于理論sgRNA數(shù)的100倍
病毒疫苗生產(chǎn)、藥物開發(fā)、基因功能研究等多個(gè)領(lǐng)域
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