1、膜蛋白表達(dá)
泓迅生物利用自主無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),成功合成全長人源STEAP1膜蛋白。膜蛋白是生物體內(nèi)細(xì)胞蛋白的重要組成部分,通常具有相對疏水的表面和柔韌性。無細(xì)胞表達(dá)技術(shù)克服了膜蛋白疏水性高、易錯(cuò)誤折疊、易沉淀的諸多難點(diǎn),無需繁瑣的提取過程,即可獲得高可溶性的膜蛋白。
無細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)通過在反應(yīng)體系中直接添加去垢劑或納米盤,可以為膜蛋白跨膜區(qū)提供疏水環(huán)境,實(shí)現(xiàn)膜蛋白正確折疊與可溶性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,去垢劑(Detergent) 與納米盤(Nanodisc)兩種形式的STEAP1膜蛋白均表現(xiàn)出優(yōu)異的抗原活性。
? 無細(xì)胞+去垢劑平臺(不表達(dá)不收費(fèi))
去垢劑形式的STEAP1膜蛋白示意圖(左)與SDS-PAGE圖(右)
去垢劑形式STEAP1膜蛋白:背景干凈、結(jié)合穩(wěn)定
? 無細(xì)胞+納米盤平臺
納米盤形式的STEAP1膜蛋白示意圖(左)與SDS-PAGE圖(右)
納米盤體系STEAP1膜蛋白:親和力強(qiáng)
去垢劑形式的STEAP1膜蛋白與其抗體的親和力約 0.619 nM;而納米盤形式的STEAP1膜蛋白與其抗體的親和力達(dá)到驚人的0.0782 nM,且膜支架蛋白與抗體無非特異結(jié)合!
去垢劑形式STEAP1膜蛋白與不同濃度梯度抗體親和結(jié)果
納米盤形式STEAP1膜蛋白與不同濃度梯度抗體親和結(jié)果
膜支架蛋白與STEAP1抗體無非特異結(jié)合
2、難度蛋白表達(dá)
泓迅生物已成功實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞難表達(dá)蛋白(例如膜蛋白)的高效快速合成,成為難表達(dá)蛋白的救星。達(dá)到96 %以上的成功率,在短短3天內(nèi)快速的交付。
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全長lgG
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Fab
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ScFv/VHH
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核酸聚合酶
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Trastuzumab
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Ranibizumab
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Brolucizumab
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Phi29 DNA聚合酶
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Toripalimab
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Cetuximab
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Caplacizumab
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末端脫氧核昔酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)
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代謝關(guān)鍵酶
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膜蛋白
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特殊靶點(diǎn)蛋白
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難表達(dá)蛋白
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Caspase-1
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水通道蛋白
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鈣網(wǎng)蛋白
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豹蛙酶
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3-磷酸甘油脫氫酶
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CXCR4
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肉毒素Hc段
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蛇毒絲氨酸蛋白酶
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限制性內(nèi)切酶
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白介素
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細(xì)胞因子
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藥用蛋白原料
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EcORI
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IL-2
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IFN2
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烏司他丁
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HindlII
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IL-4
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GM-CSF
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瑞替普酶
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Smal
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IL-7
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VEGF
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轉(zhuǎn)肽酶
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BamHl
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IL-15
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EGF
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藍(lán)藻抗病毒蛋白N
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Xbal
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IL-21
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wnt3a
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血紅素加氧酶
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3、非天然氨基酸插入
非天然氨基酸(non-natural amino acids, nnAAs)有結(jié)構(gòu)多樣的側(cè)鏈基團(tuán),將其插入到蛋白質(zhì)中可賦予蛋白質(zhì)新的化學(xué)性質(zhì)、結(jié)構(gòu)及生物功能。
泓迅生物依托其無細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)平臺,提供位點(diǎn)特異性非天然氨基酸插入服務(wù)。該技術(shù)能夠快速、高效地合成含有精準(zhǔn)定位nnAA的蛋白質(zhì),并已在GFP及VHH蛋白的多位點(diǎn)嵌入實(shí)驗(yàn)中成功驗(yàn)證。服務(wù)支持pAcF與pAzF等非天然氨基酸,適用于精準(zhǔn)抗體偶聯(lián)藥物開發(fā),同時(shí)可基于客戶提供的組分開展定制化nnAA測試。

插入效率測試