A：針對(duì)客戶的需求，我們有以下純化方式供選擇：硅膠膜離心柱純化；氯化鋰純化；Oligo（dT）純化;反向色譜純化；HPLC-SEC純化。

A：我們提供液體發(fā)貨（無(wú)菌無(wú)酶水）和干粉狀（非凍干）兩種發(fā)貨形式。

A：首先主要看客戶選擇或者客戶的下游應(yīng)用，

如果客戶期望蛋白有翻譯后修飾、活性等，可以在三個(gè)真核系統(tǒng)中選擇；（三個(gè)真核系統(tǒng)里我們會(huì)更傾向于哺乳系統(tǒng)）

如果客戶對(duì)蛋白量需求比較高，可以選大腸桿菌，表達(dá)量高，成本比較低；

如果客戶下游做抗原，可以選大腸桿菌；

如果客戶給了序列信息，我們會(huì)查找有沒(méi)有相關(guān)產(chǎn)品和文獻(xiàn)參考；

最終系統(tǒng)還是要客戶選擇。

A：可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行嘗試：

如果有稀有密碼子，可以嘗試重新進(jìn)行密碼子優(yōu)化（即需要重新基因合成）

如果蛋白分子量過(guò)大或過(guò)小，可以嘗試截短表達(dá)或融合大標(biāo)簽表達(dá)（即需要重新構(gòu)質(zhì)粒）。

如果是毒性蛋白，可以嘗試pLysS菌株。

更換表達(dá)系統(tǒng)（即需要重新基因合成）。

A：可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行嘗試：

a、優(yōu)化宿主細(xì)胞（Origami B(DE3)，Rosetta gami(DE3)，Shuffle等）

b、與分子伴侶共表達(dá)，分子伴侶可以幫助蛋白形成正確的三維結(jié)構(gòu)

C、融合促溶標(biāo)簽，(SUMO/GST/MBP/等)（這是我們最常用的促溶方法，促溶標(biāo)簽最常用sumo，而且原核系統(tǒng)免費(fèi)提供酶切）

d、更換表達(dá)載體，pET系列載體表達(dá)量高，但包涵體概率也高，pCold低溫表達(dá)載體理論上可提高蛋白可溶性

e、優(yōu)化培養(yǎng)條件（溫度、IPTG濃度、培養(yǎng)基成分）

f、分泌性表達(dá)，融合大腸桿菌分泌信號(hào)肽，將蛋白引導(dǎo)至周質(zhì)空間（不建議，周質(zhì)空間蛋白量少，濃度低）

A：重組蛋白是存在不表達(dá)的風(fēng)險(xiǎn)的，可能與蛋白自身性質(zhì)有關(guān)，比如膜粘連蛋白、植物來(lái)源的蛋白，或者分子量過(guò)大或過(guò)小的蛋白、毒性蛋白等。

A：重組蛋白是存在不表達(dá)的風(fēng)險(xiǎn)的，可能與蛋白自身性質(zhì)有關(guān)，比如膜粘連蛋白、植物來(lái)源的蛋白，或者分子量過(guò)大或過(guò)小的蛋白、毒性蛋白等。

A：可能是有的，理論上可能沒(méi)有上清蛋白活性好。

A：優(yōu)先親和純化，如果要求進(jìn)行凝膠過(guò)濾層析，離子交換層析等，需要額外收費(fèi)。

A：HIS/GST/MBP/Flag/Fc，其中Flag填料成本較高，需要額外收費(fèi)。

A：原核系統(tǒng)可以使用pet-duet-1載體，分別在兩個(gè)MSC區(qū)構(gòu)建目的蛋白；

昆蟲(chóng)系統(tǒng)可以使用pFastBacDual載體，插入一條目的序列后，需反向互補(bǔ)后，再插入另一條序列。

哺乳系統(tǒng)可以構(gòu)建兩個(gè)質(zhì)粒，一起轉(zhuǎn)染，載體和細(xì)胞沒(méi)有要求。

酵母系統(tǒng)可以構(gòu)建兩個(gè)質(zhì)粒，pPIC9質(zhì)粒先轉(zhuǎn)化GS115菌株，檢測(cè)蛋白若有表達(dá)， 將GS115制備成感受態(tài)再轉(zhuǎn)入pPICZ質(zhì)粒。

A：增加孵育時(shí)間：給予蛋白與填料足夠的結(jié)合時(shí)間；增加填料體積：增加蛋白與填料之間碰撞幾率，從而提高結(jié)合效率。