首頁(yè) > 抗體工程平臺(tái) > 穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建

穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建

穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建是指將外源DNA克隆到具有某種抗性或者選擇基因的載體上，轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞后，利用載體中所含的選擇標(biāo)志進(jìn)行篩選，得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。

泓迅生物提供一系列穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)，用于全長(zhǎng)抗體及抗體片段、Fc融合蛋白、多種細(xì)胞表面受體、胞質(zhì)和分泌蛋白等重組蛋白/抗體的穩(wěn)定及規(guī)?；a(chǎn)。

服務(wù)優(yōu)勢(shì)

從基因合成到篩選，提供全流程服務(wù)
CHO1.0穩(wěn)轉(zhuǎn)載體，配合嘌呤霉素+MTX篩選系統(tǒng)
高效穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及Pool篩選
可對(duì)重組蛋白/抗體全長(zhǎng)或片段進(jìn)行個(gè)性化表達(dá)

服務(wù)詳情

服務(wù)項(xiàng)目	服務(wù)詳情	項(xiàng)目周期	交付內(nèi)容
基因合成	全基因合成，提供表達(dá)載體	2-3周	√ 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株pool √ 項(xiàng)目報(bào)告
小量表達(dá) 分析鑒定	質(zhì)粒小量抽提，鑒定，轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞，分析表達(dá)量，純化，活性與純度檢測(cè)	2周
minipool篩選 (>0.2g/L)	1. 電轉(zhuǎn)后進(jìn)行加壓篩選； 2. 孔板篩選與擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)； 3. minipool產(chǎn)量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)； 4. Top12候選株Fed-Batch（不少于10天）抗體表達(dá)30ml； 5. Top3候選與建庫(kù)；	7-12周
單克隆篩選	1. 有限稀釋單克隆篩選； 2. 產(chǎn)量檢測(cè)； 3. 細(xì)胞過(guò)程培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)； 4. 單克隆篩選過(guò)程記錄數(shù)據(jù)； 5. Top25單克隆Fed-Batch（不少于10天）抗體表達(dá)30ml； 6. Top3候選單克隆建庫(kù)； 7. 單克隆不低于0.5g/L表達(dá)水平，三代穩(wěn)定性；	6-10周

在線咨詢

服務(wù)流程

案例分享查看詳細(xì)

我們通過(guò) PvuI 線性化質(zhì)粒、電轉(zhuǎn) CHO 細(xì)胞、L-MSX 篩選和高通量ELISA鑒定，成功獲得一株表達(dá)量達(dá)0.8 g/L、活性優(yōu)良（EC50=0.004）的穩(wěn)轉(zhuǎn)克隆 2B1。該細(xì)胞株經(jīng) Fed-batch 培養(yǎng)驗(yàn)證，表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng)穩(wěn)定性和表達(dá)一致性。

ELISA 陽(yáng)性克隆篩選：鑒定出80%以上為陽(yáng)性克隆，其中 2B1 克隆表達(dá)量最高。

Fed-batch 培養(yǎng)：通過(guò)優(yōu)化補(bǔ)料策略，最終表達(dá)量達(dá)到0.8 g/L。

活性驗(yàn)證：穩(wěn)轉(zhuǎn)株抗體活性（EC50=0.004）與瞬轉(zhuǎn)株（EC50=0.003）相當(dāng)，表明穩(wěn)轉(zhuǎn)株具有良好的功能活性。

常見問(wèn)題

構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株有必要嗎？

如果您需要對(duì)過(guò)表達(dá)或者表達(dá)降低目的基因的細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)試驗(yàn)，那么構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株是有必要的。
第一，可以減少不同批次實(shí)驗(yàn)中轉(zhuǎn)染效率差異帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異，提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。
第二，構(gòu)建好細(xì)胞系后不必再進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)以及反復(fù)制備質(zhì)粒，減少工作量。
第三，不再使用價(jià)格高昂的轉(zhuǎn)染試劑，節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。

所有細(xì)胞株都可以構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系嗎？

不是所有的細(xì)胞株都能構(gòu)建成為穩(wěn)定細(xì)胞系的。構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系需要滿足2個(gè)條件：

1、細(xì)胞能穩(wěn)定傳代；

2、細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率滿足要求。

更多常見問(wèn)題 >>

資源中心