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納米抗體（Nanobody），又稱單域抗體，源自駱駝科動(dòng)物（如羊駝）的重鏈抗體可變區(qū) VHH 結(jié)構(gòu)，分子量?jī)H約15 kDa，約為傳統(tǒng)抗體的1/10。其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性強(qiáng)、親和力高，被廣泛應(yīng)用于腫瘤免疫治療、細(xì)胞療法等研究領(lǐng)域。
泓迅生物構(gòu)建了從抗原制備、動(dòng)物免疫直至表達(dá)純化的全流程服務(wù)體系。憑借在抗原設(shè)計(jì)、羊駝免疫、文庫(kù)構(gòu)建與高通量篩選等環(huán)節(jié)的技術(shù)積淀，我們確保從源頭免疫到終產(chǎn)物交付的每一環(huán)節(jié)，為您提供高效、可靠的納米抗體定制解決方案，致力于將您的靶點(diǎn)構(gòu)想，高效轉(zhuǎn)化為可靠的研發(fā)工具或候選藥物。
| 階段 | 服務(wù)內(nèi)容 | 周期 (周) | 交付物 |
|---|---|---|---|
| 階段1：抗原制備 | *蛋白抗原純度和內(nèi)毒素鑒定（>5mg/蛋白抗原） | 1-2 | 蛋白抗原鑒定報(bào)告 |
| 蛋白抗原偶聯(lián)載體蛋白后進(jìn)行免疫（可選） | 1 | 200ug 偶聯(lián)載體蛋白的抗原 | |
| 階段2：羊駝免疫（5次）和PBMC分離 |
*1只成年免疫羊駝，兩種蛋白抗原免疫5次以上，每次0.5-1mg *PBMC分離 |
8-10 |
5ml免前血清和第3次免疫后血清； 3免后血清ELISA報(bào)告 |
| 階段3：構(gòu)建VHH噬菌體抗體庫(kù) |
*RNA提取和cDNA制備 *擴(kuò)增VHH基因片段，構(gòu)建納米抗體免疫文庫(kù) *抗體庫(kù)質(zhì)量鑒定，挑選96個(gè)單克隆進(jìn)行測(cè)序，分析序列多樣性和正確率 |
4-6 |
中間產(chǎn)物（如RNA或cDNA）； 提供文庫(kù)質(zhì)檢報(bào)告，VHH容量達(dá)到108 - 109； 噬菌體展示納米抗體免疫文庫(kù) （包含文庫(kù)甘油菌1ml*10支和文庫(kù)噬菌體質(zhì)粒10ug） |
| 階段4：噬菌體展示篩選和克隆鑒定 |
*抗原施壓法進(jìn)行3-5輪淘選 *挑取至少288個(gè)克隆進(jìn)行ELISA驗(yàn)證 *鑒定和評(píng)估陽(yáng)性克隆 *陽(yáng)性克隆測(cè)序和測(cè)序結(jié)果分析 |
4-6 |
最后一次淘選產(chǎn)物； ELISA篩選報(bào)告； 每個(gè)蛋白抗原提供3-5個(gè)獨(dú)特序列 |
| 階段5：納米抗體表達(dá)生產(chǎn)和測(cè)活驗(yàn)證 |
*3-5個(gè)納米抗體基因克隆至真核表達(dá)載體 *重組抗體表達(dá)和QC測(cè)活驗(yàn)證 |
2-4 |
0.1-0.5mg純化納米抗體（SDS-PAGE>90%，內(nèi)毒素水平<5EU/mg）和對(duì)應(yīng)菌株； 納米抗體ELISA檢測(cè)報(bào)告 |
注：客戶提供抗原的要求：純度> 85%，濃度> 1 mg/mL，緩沖液為PBS。
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